Każdy z 36 zespołów rozegra osiem spotkań z różnymi przeciwnikami: cztery u siebie i cztery na wyjeździe. Pierwsza kolejka odbędzie się 8 września, a ostatnia 27 stycznia 2027 roku. Bezpośredni awans do 1/8 finału wywalczy osiem najlepszych drużyn. Zespoły z miejsc 9–24 zagrają w dwumeczach barażowych, natomiast ekipy sklasyfikowane od 25. pozycji zostaną wyeliminowane z europejskich rozgrywek.
Obrońca tytułu Paris Saint-Germain podejmie Barcelonę oraz Manchester City, a także Aston Villę. Na wyjazdach paryżanie zagrają z Barceloną i Manchesterem City. City czeka również spotkanie z Napoli, w którym dojdzie do powrotu Kevina De Bruyne’a do Manchesteru. Angielski klub zmierzy się ponadto ze Sportingiem, Porto, RB Lipsk, AEK Ateny i Lens.
Arsenal podejmie Real Madryt, a zagra na wyjeździe z Bayernem Monachium. Wicemistrzowie Anglii spotkają się także z Borussią Dortmund, Realem Betis, Lille, Napoli, Sabah i Slavią Praga. Aston Villa, wracająca do Ligi Mistrzów po sezonie przerwy, oprócz PSG podejmie Dortmund, a na wyjazdach zagra z Barceloną i Galatasaray. Finał zaplanowano na 5 czerwca 2027 roku na stadionie Metropolitano w Madrycie.